期刊简介
本刊是中华人民共和国卫生部主管的全国性医学学术期刊，创刊于1981年，月刊，国内外公开发行。报导内容包括各有关学科（内、外、妇、儿、神经等）疾病导致的急危重病单一脏器或多个脏器、系统功能损害或衰竭的发病机制的基础实验研究、临床救治方法研究及救治经验。主要栏目有论著、述评、讲座、临床研究、经验交流、专家笔谈、病例报告等。
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首页>中国急救医学杂志
- 杂志名称：中国急救医学杂志
- 主管单位：国家卫生和计划生育委员会
- 主办单位：中国医师协会、黑龙江省科学技术情报研究所
- 国际刊号：1002-1949
- 国内刊号：23-1201/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：临床医学与特种医学中文核心期刊期刊收录：国家图书馆馆藏, 上海图书馆馆藏, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 知网收录(中), 维普收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), CA 化学文摘(美), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 万方收录(中)
TLR4干扰RNA腺病毒的构建及其对肺泡巨噬细胞内毒素反应的影响
吴飞翔；吕欣；俞卫锋；黄盛东；徐学武；孙玉明；袁扬；卞金俊
关键词：Toll样受体4, RNA干扰, 腺病毒, TNF-α, IL-10
摘要：目的 构建表达大鼠TLR4 siRNA的腺病毒,并观察对内毒素诱导的大鼠肺泡巨噬细胞TLR4的抑制和TNF-α、IL-10释放的影响.方法合成双链寡核苷酸并克隆人pShuttleH1载体,pShutdeH1-TLR4线性化后电转化到含pAdEasy-l的BJ5183感受态细菌中获取重组质粒,重组质粒用脂质体转染293细胞获取重组腺病毒Ad-siTLR4;扩增、纯化腺病毒,TCID50法测定病毒滴度.原代培养大鼠肺泡巨噬细胞,腺病毒Ad-siTLR4感染后加入内毒素,采用RT-PCR和Westem blot观察TLR4蛋白及mRNA的表达,ELISA检测TNF-α、IL-10的释放情况.结果目的基因序列正确并成功克隆人腺病毒,腺病毒Ad-siTLR4滴度为5.72×109 pfu/mL.转染腺病毒后的内毒素诱导的肺泡巨噬细胞TLR4蛋白和mRNA水平下降,TNF-α、IL-10的表达均明显减弱.结论本研究成功构建了表达大鼠TLR4 siRNA的腺病毒,具有良好的抑制TLR4和TNF-α、IL-10的作用,为下一步动物体内实验基因治疗急性肺损伤奠定良好的基础.
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